當(dāng)阿爾茨海默病(AD)研究聚焦于 APOE4 介導(dǎo)的神經(jīng)免疫紊亂,當(dāng)膽固醇堆積、脂筏異常成為破解病理機(jī)制的關(guān)鍵突破口,你是否在尋找能精準(zhǔn)捕捉這些分子變化的實(shí)驗(yàn)工具?
近期《Translational Neurodegeneration》(IF:10.8)一篇題為“TRPV1 alleviates APOE4-dependent microglial antigen presentation and T cell infltration in Alzheimer’s disease"的重磅研究為 AD 機(jī)制帶來新洞見:APOE4 通過 ER 應(yīng)激 - Ca2?-SREBP2 通路誘發(fā)微膠質(zhì)細(xì)胞膽固醇堆積,進(jìn)而增強(qiáng) MHC II 抗原呈遞與 T 細(xì)胞浸潤,而 TRPV1 agonist 可逆轉(zhuǎn)這一病理過程。值得關(guān)注的是,這項(xiàng)研究的核心數(shù)據(jù)支撐,離不開Absin Filipin III(貨號:abs42018484)與Absin CTxb-FITC(貨號:abs80003)的精準(zhǔn)助力 —— 這對 “探針組合",正成為 AD 及神經(jīng)退行性疾病研究的得力助手!
Filipin III:膽固醇代謝異常的 “可視化zhen探"
在 AD 病理中,微膠質(zhì)細(xì)胞的膽固醇堆積是觸發(fā)免疫紊亂的 “導(dǎo)huo索"。而 Filipin III 作為特異性膽固醇結(jié)合熒光探針,能讓這一 “隱形" 病理變化清晰可見:
精準(zhǔn)定位,直擊核心:特異性結(jié)合細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇,通過藍(lán)色熒光信號(激發(fā)/發(fā)射波長~355/460 nm)精準(zhǔn)標(biāo)記膽固醇分布,無論是 BV2 細(xì)胞內(nèi)的彌散積累,還是溶酶體中的異常聚集,都能被清晰捕捉。
量化分析,數(shù)據(jù)可靠:在文獻(xiàn)研究中,科研團(tuán)隊(duì)用 50μg/mL Filipin III 對 BV2 細(xì)胞染色 2 小時,結(jié)合 ImageJ 定量分析,明確證實(shí) “APOE4+PHF 組膽固醇積累顯著高于 APOE3 組,辣椒素干預(yù)后可逆轉(zhuǎn)",為 “膽固醇堆積是 APOE4 致 AD 的關(guān)鍵環(huán)節(jié)" 提供直接證據(jù)。
靈活兼容,場景廣泛:可與溶酶體染料(如 LysoTracker Red)聯(lián)合使用,觀察膽固醇在亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的定位;也適用于小鼠腦組織切片,助力體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)互證,全fang位解析膽固醇代謝異常的病理意義。


Filipin III 與 LysoTracker Red 聯(lián)合染色,觀察溶酶體中膽固醇聚集情況
CTxb-FITC:脂筏與抗原呈遞的 “定位導(dǎo)航儀"
脂筏作為細(xì)胞膜上的信號平臺,其與 MHC II 分子的結(jié)合是抗原呈遞的關(guān)鍵步驟。而CTxb-FITC(霍亂毒素B亞基偶聯(lián)FITC),正是解鎖這一機(jī)制的 “鑰匙":
靶向脂筏,精準(zhǔn)標(biāo)記:特異性結(jié)合脂筏上的 GM1 神經(jīng)節(jié)苷脂,通過綠色熒光(激發(fā)/發(fā)射波長~495/519 nm)清晰勾勒脂質(zhì)筏輪廓,為 MHC II 分子的定位分析提供 “坐標(biāo)系統(tǒng)"。
共定位分析,揭示機(jī)制:在文獻(xiàn)研究中,科研團(tuán)隊(duì)將 8μg/mL CTxb-FITC 與 MHC II-PE 抗體聯(lián)合染色(4℃孵育 30 分鐘),通過共聚焦顯微鏡觀察到 “APOE4+PHF 組 MHC II 在脂質(zhì)筏上的聚集顯著增加,辣椒素可減少這一聚集",直接證實(shí) “APOE4 通過脂質(zhì)筏調(diào)控 MHC II 抗原呈遞" 的核心機(jī)制。
操作便捷,信號穩(wěn)定:無需復(fù)雜預(yù)處理,固定后直接染色即可獲得穩(wěn)定熒光信號,且與免疫熒光實(shí)驗(yàn)流程兼容,輕松融入現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)體系,助力快速獲得高質(zhì)量共定位數(shù)據(jù)。

ApoE4+PHF 處理及辣椒素干預(yù)后,BV2 細(xì)胞中 MHC II 在脂筏(CTxb-FITC 標(biāo)記)上的分布變化
表1 Filipin III 與 CTxb-FITC 實(shí)驗(yàn)操作步驟對照表
| 對比維度 | Filipin III(膽固醇檢測探針) | CTxb-FITC(脂筏標(biāo)記探針) |
| 核心作用 | 1. 特異性結(jié)合細(xì)胞內(nèi)膽固醇,通過熒光信號可視化膽固醇分布 2. 定量分析細(xì)胞(如 BV2 細(xì)胞、小鼠腦微 glia)中膽固醇積累水平 3. 聯(lián)合溶酶體染料(LysoTracker Red)觀察膽固醇在溶酶體中的聚集情況 | 1. 特異性結(jié)合細(xì)胞膜脂質(zhì)筏上的 GM1 神經(jīng)節(jié)苷脂,標(biāo)記脂質(zhì)筏位置 2. 觀察 MHC II 分子在脂質(zhì)筏上的定位與聚集,探究抗原呈遞機(jī)制 |
| 實(shí)驗(yàn)樣本 | 1. 體外:BV2 小鼠微 glia 細(xì)胞系 2. 體內(nèi):小鼠腦組織切片(海馬區(qū)) | 體外:BV2 小鼠微 glia 細(xì)胞系 |
| 關(guān)鍵處理步驟 | 1. 固定:4% 多聚甲醛室溫固定20min(細(xì)胞樣本) 2. 洗滌:PBS 洗滌3次,去除固定液 3. 染色:50μg/mL Filipin III(含 10% FBS 的 PBS 配置)室溫孵育2h 4. 聯(lián)合染色(若需):先加 50nM LysoTracker Red 37℃避光孵育30min,洗滌后再進(jìn)行 Filipin III 染色 5. 核染色:DAPI 室溫孵育10min,標(biāo)記細(xì)胞核 | 1. 固定:4% 多聚甲醛室溫固定10min 2. 封閉:含 5% 牛血清白蛋白的 PBS 室溫封閉 3. 染色:加入 8μg/mL CTxb-FITC + 2μg/ml MHC II-PE 抗體,4℃孵育 30 分鐘 4. 核染色:DAPI 室溫孵育 10 分鐘,標(biāo)記細(xì)胞核 |
| 成像與分析工具 | 1. 成像:TCS SP8 激光共聚焦顯微鏡(40× 或 63× 物鏡) 2. 分析:ImageJ 軟件量化熒光強(qiáng)度/陽性區(qū)域占比 | 1. 成像:TCS SP8 激光共聚焦顯微鏡(63×1.4 NA 物鏡) 2. 分析:ImageJ 軟件計(jì)算 MHC II與CTxb-FITC 的共定位系數(shù) |
| 關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)參數(shù) | 1. 染液濃度:50μg/mL 2. 孵育時間:2h 3. 孵育溫度:室溫 4. 聯(lián)合染料:LysoTracker Red(50nM,37℃孵育 30 分鐘) | 1. 染液濃度:8μg/mL 2. 孵育時間:30min 3. 孵育溫度:4℃ 4. 聯(lián)合抗體:MHC II-PE(2μg/mL) |
| 實(shí)驗(yàn)結(jié)論支撐 | 1. 證明 APOE4 會導(dǎo)致微 glia 中膽固醇積累 2. 驗(yàn)證辣椒素可通過 TRPV1 抑制膽固醇合成,減少膽固醇積累 | 1. 證明 APOE4 會促進(jìn) MHC II 在脂質(zhì)筏上聚集 2. 驗(yàn)證辣椒素可降低 MHC II 在脂質(zhì)筏的定位,抑制抗原呈遞 |
當(dāng) AD 研究進(jìn)入 “分子機(jī)制精細(xì)化" 時代,精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)工具是突破瓶頸的關(guān)鍵。Absin Filipin III (abs42018484)與 CTxb-FITC(abs80003),已通過高分文獻(xiàn)驗(yàn)證,為膽固醇代謝、脂筏功能研究提供 “可視化 + 定量化" 解決方案。
引用文獻(xiàn):
[1]Transl Neurodegener. 2024 Oct 29;13(1):52. doi: 10.1186/s40035-024-00445-6. PMID: 39468688 IF:10.8
[2]Gastroenterology. 2025 Sep;169(4):615-631.e32. doi: 10.1053/j.gastro.2025.03.019. Epub 2025 Mar 28. PMID: 40158738 IF:25.7
[3]Autophagy. 2025 Jun;21(6):1263-1282. doi: 10.1080/15548627.2025.2469129. Epub 2025 Mar 10. PMID: 39988734 IF:14.6
[4] Redox Biol. 2025 Feb:79:103469. doi: 10.1016/j.redox.2024.103469.Epub 2024 Dec 12.PMID: 39700693 IF:10.7
[5]TAntiviral Res. 2023 Aug:216:105662. doi: 10.1016/j.antiviral.2023.105662. Epub 2023 Jun 29. PMID: 37393054 IF:7.6
[6]J Transl Med. 2023 Oct 17;21(1):733. doi: 10.1186/s12967-023-04609-2. PMID: 37848983 IF:7.4
本期產(chǎn)品推薦:
| 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| abs42018484 | 菲律平 | 1mg |
| abs80003 | CTxB-FITC | 1mg |
| abs47038871 | 溶酶體紅色熒光探針(FluoLyso Red) | 50μL×10 |
| abs47038872 | 溶酶體深紅色熒光探針(FluoLyso Deep Red) | 50μL×10 |
| abs47038870 | 溶酶體綠色熒光探針(FluoLyso Green) | 50μL×10 |
| abs45128173 | Amyloid β-Peptide (1-42) (human) | 5 mg |
| abs44056601 | Amyloid β-Peptide (1-40) (human) | 5 mg |
| abs45151799 | Amyloid β-Protein (25-35) | 5 mg |
| abs817025 | 辣椒素 | 50 mg |
| abs9157 | 牛血清白蛋白 | 100 g |
| abs42016321 | DAPI | 10 mg |
| abs972 | 胎牛血清(優(yōu)級) | 500 mL |
| abs1850211 | APC Rat anti-Mouse MHC Class II Antibody(NIMR-4) | 100T |

Absin產(chǎn)品線:
爆款產(chǎn)品:十da試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測);細(xì)胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...
特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...
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