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當(dāng)前位置：上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>如何選擇適合的免疫組化對(duì)照
免疫組化對(duì)照的選擇其實(shí)是個(gè)技術(shù)直接看關(guān)鍵點(diǎn)：
一、對(duì)照類型怎么選
?陽(yáng)性對(duì)照?
?選材?：用已知表達(dá)目標(biāo)抗原的組織（如HER2檢測(cè)用乳腺癌組織）
?關(guān)鍵?：與實(shí)驗(yàn)組同步處理，避免固定時(shí)間差異
?陰性對(duì)照?
?兩種方案?：
省略一抗，僅用二抗+顯色劑
用同種屬無(wú)關(guān)抗體替代一抗
?注意?：若顯色，需排查抗體交叉反應(yīng)
?空白對(duì)照?
?操作?：僅用二抗+顯色劑
?意義?：排除二抗非特異性結(jié)合
?替代對(duì)照?
?操作?：用同種屬無(wú)關(guān)抗體替代一抗
?示例?：一抗為mouse anti rat CD11b，同型對(duì)照為mouse IgG2a
二、操作要點(diǎn)
?陽(yáng)性對(duì)照?：需用獨(dú)立已知陽(yáng)性樣本驗(yàn)證體系有效性
?陰性對(duì)照?：需用不表達(dá)目標(biāo)抗原的樣本
?空白對(duì)照?：需省略一抗，僅用二抗和顯色劑
?同型對(duì)照?：需嚴(yán)格匹配一抗的種屬、Ig亞型、標(biāo)記物及濃度等參數(shù)
三、結(jié)果判讀
?陽(yáng)性對(duì)照?：若未顯色，需排查抗體失效或操作失誤
?陰性對(duì)照?：若顯色，需排查抗體交叉反應(yīng)或封閉不充分
?空白對(duì)照?：若顯色，需排查二抗非特異性結(jié)合
?總結(jié)?：對(duì)照設(shè)置需嚴(yán)格匹配抗體特性、染色系統(tǒng)及背景干擾，通過多維度對(duì)照確保結(jié)果真實(shí)性。
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